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Midori Green Advance核酸染料

更新時間:2024-03-14

簡要描述:

MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance是傳統核酸染(ran)色(se)劑(ji)溴化(hua)乙錠(ding)的(de)(de)安全替(ti)代品。 它是一種(zhong)非致(zhi)癌性和低致(zhi)突變(bian)性染(ran)料,具有很高的(de)(de)靈敏度,可用于檢測瓊脂糖凝膠中(zhong)的(de)(de)dsDNA,ssDNA和RNA。 MIDORIGreen Advance可以與(yu)紫外線或我(wo)們創(chuang)新的(de)(de)藍/綠LED技術結合使用。

Catalogue number: MG04(貨號:MG04)

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining(1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色劑(ji),用于凝膠或后染色)

Benefits(優點):

  • Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels(瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內染色)
  • No toxicity, non-carcinogenic(無毒,無致癌性)
  • Safe alternative to ethidium bromide(溴化乙錠的安全替代品
  • High fluorescence(高熒光)
  • Optimal for UV-light(優化適合(he)紫外線)

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下一代凝膠內染色

MIDORIGreen Advance是第二代非(fei)致癌染料。 經過紫外線或藍/綠光激發后,信號更優(you)(you)化。 它(ta)保持了諸如(ru)非(fei)致癌性和(he)優(you)(you)異(yi)的(de)信噪比等(deng)優(you)(you)勢(shi)。 如(ru)圖所示(shi)。 1當使用Blue / Green LED技術時,MIDORIGreen Advance比溴乙錠更好。

圖1:使用(yong)藍/綠LED透射照明器比較(jiao)MIDORIGreen Advance(左綠色)和溴化(hua)乙錠(右(you)紅色)的靈敏度(du)。


MIDORIGreen Advance即使(shi)對(dui)于較小的DNA片段也顯示出很高的靈敏度。 MIDORIGreen Advance的稀釋(shi)倍數可高達(da)1:25000。 因此,對(dui)于100 ml瓊(qiong)脂糖凝(ning)膠染(ran)色,4-6μl足夠,導致(zhi)?17至(zhi)25升染(ran)色的瓊(qiong)脂糖凝(ning)膠。


經驗證的安全性

良好地替代誘變的(de)DNA染色劑溴化(hua)乙錠(ding)以(yi)傳遞強(qiang)(qiang)信(xin)號是*的(de)。 MIDORIGreen Advance發出(chu)的(de)信(xin)號強(qiang)(qiang)度(du)相當(dang)。 但是,不(bu)得危及用戶的(de)安全。 因此,使用MIDORIGreen Advance進行了(le)幾次測試,根據這些測試,MIDORIGreen Advance是安全的(de)。

 

染色Protocol:

凝膠內染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液(濃度為0.8-3.0%)并加熱,直到溶液*澄清,看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain,輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC,然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時,加載樣品并進行電泳。
使用(yong)UV或(huo)(huo)LED照(zhao)明器檢測(ce)波段。黃色(se)或(huo)(huo)綠色(se)的明膠或(huo)(huo)玻璃紙濾(lv)鏡應用(yong)于攝影。


后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應優選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠,每100 ml緩沖液應使用10-25 µl的污漬。
合(he)適(shi)的染色時間(5 – 60分鐘)和污漬的數(shu)量可能取決于凝膠(jiao)的厚度。


注意:不建議將SDS包含在加載緩沖液中使用(yong)(yong),因(yin)為由污(wu)點和SDS相互作(zuo)用(yong)(yong)引起的條(tiao)帶外觀!

 

客戶常見問題解答(FAQ)

問:我可以將Midori Green Advance與脈沖(chong)場(chang)凝膠(jiao)電泳(yong)(PFGE)一(yi)起使(shi)用(yong)嗎(ma)?通常,我使(shi)用(yong)EtBr進行后期處(chu)理。

答:您可以在&ldquo;Protocol”部分中找到進行(xing)后染(ran)色(se)的方案。

 

問(wen):您是否有處(chu)(chu)置Midori Green Advance的詳細信(xin)息?我了解該分子對光(guang)敏(min)感,我想知道MGA凝膠在使用(yong)后(hou)是否可以在處(chu)(chu)置前暴(bao)露于光(guang)下?

答:MGA無毒,足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發射率會被光破壞,但這并不意味著化學結構會發生變化。但是沒有必要破壞分子,因為它仍然無害。與溴化乙錠相比,這是*的優勢–無需特殊處理。

 

問(wen):為什(shen)么不能以(yi)相同(tong)方式使用MGA和(he)MGD?

答(da):化(hua)(hua)學結(jie)構*不同。我(wo)們(men)(men)(men)測試過(guo)將MGD用作(zuo)(zuo)MGA,反之亦然。我(wo)們(men)(men)(men)不能同時(shi)推薦(jian)這兩種(zhong)應(ying)用。當您(nin)(nin)嘗試將MGD用作(zuo)(zuo)MGA時(shi),您(nin)(nin)需(xu)要(yao)大(da)量(liang)MGD和(he)階梯才能獲得(de)可(ke)觀察(cha)的波(bo)段(duan)。通過(guo)這種(zhong)方(fang)(fang)式(shi)可(ke)以(yi)檢測不到(dao)低濃(nong)度(du)的樣(yang)品(pin)。 MGD設(she)計(ji)用于添(tian)加(jia)樣(yang)品(pin),并且濃(nong)縮程(cheng)度(du)遠低于MGA。以(yi)MGA之類的方(fang)(fang)式(shi)使用MGD是(shi)非常不經濟的–您(nin)(nin)需(xu)要(yao)在凝(ning)膠(jiao)中添(tian)加(jia)10倍(bei)以(yi)上(shang)的量(liang)才能觀察(cha)條(tiao)帶。當您(nin)(nin)嘗試將MGA用作(zuo)(zuo)MGD時(shi),也會(hui)出現問題,因為MGA的濃(nong)度(du)過(guo)高,并且運行方(fang)(fang)向相反。我(wo)試圖降低MGA濃(nong)度(du),在這種(zhong)情況下(xia),您(nin)(nin)會(hui)看到(dao)一些(xie)條(tiao)帶,但(dan)它們(men)(men)(men)與所(suo)使用的稀釋液無關,非常弱。總結(jie)一下(xia),您(nin)(nin)可(ke)以(yi)說兩種(zhong)染料都是(shi)針對不同的應(ying)用(在凝(ning)膠(jiao)中和(he)添(tian)加(jia)到(dao)樣(yang)品(pin)中)設(she)計(ji)的(具有不同的結(jie)構式(shi))和(he)優化(hua)(hua)的,因此不建(jian)議嘗試以(yi)其(qi)他(ta)方(fang)(fang)式(shi)使用它們(men)(men)(men)。

 

問(wen):MGA和MGD有什么區別(bie)?這些污漬的(de)穩定性如何?

答:主要區別(bie)在(zai)(zai)于Midori Green Advance(MGA)用(yong)于凝(ning)膠(jiao)和后染色(se)(se)(se)(意(yi)味著它像溴化(hua)乙(yi)錠一樣使用(yong)),而(er)Midori Green Direct(MGD)直接添加到(dao)樣品中。根據凝(ning)膠(jiao)文(wen)檔系統的不(bu)同(tong),我們(men)(men)建議您使用(yong)一種或另一種,但您可(ke)以在(zai)(zai)每(mei)種照(zhao)(zhao)明器(UV 302、365 nm,藍色(se)(se)(se)照(zhao)(zhao)明器和藍色(se)(se)(se)/綠(lv)色(se)(se)(se)透射照(zhao)(zhao)明器)中同(tong)時使用(yong)這(zhe)兩(liang)種照(zhao)(zhao)明器–只有性能(neng)可(ke)以提高(gao)到(dao)合適水平(ping)。例如(ru),如(ru)果用(yong)戶(hu)使用(yong)UV透照(zhao)(zhao)器,我們(men)(men)建議使用(yong)MGA,因為使用(yong)該色(se)(se)(se)斑的效果非常好。我們(men)(men)的藍/綠(lv)色(se)(se)(se)LED儀器和MGD可(ke)帶來(lai)非常出色(se)(se)(se)的性能(neng)-*沒有背(bei)景(jing),而(er)且信號強度很(hen)高(gao)。兩(liang)種污(wu)漬在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)均穩定,因此在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)運輸(shu)沒有問(wen)題,但我們(men)(men)建議將污(wu)漬保存在(zai)(zai)4°C下(xia)。

 

問:MGA和(he)MGD是否可以與(yu)瓊脂糖和(he)丙烯酰胺凝膠一起使用(yong)?

答(da):我(wo)們的客(ke)戶給我(wo)們反(fan)饋(kui)說MDG和(he)MGA(染色(se)后)可用于丙烯酰胺凝(ning)膠(jiao),但主要(yao)是為(wei)瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)設(she)計的。

 

問:如(ru)果(guo)我將MGA在-20°C下保(bao)存6天會怎樣?可以使用嗎?

答:凍(dong)結會破壞MGA的功(gong)能。您仍(reng)然(ran)可以嘗試(shi),但我(wo)們(men)的經驗(yan)使冷(leng)凍(dong)后的照明失效。

 

問:我在瓊脂糖(tang)凝膠中使用Midori Green Advance,為(wei)什(shen)么在凝膠電泳35分鐘后看不見小條帶,您(nin)有什(shen)么建議(yi)?

答:Midori Green Advance可能帶有電(dian)荷(he),并且與DNA的(de)方(fang)向不(bu)同,因此(ci)凝(ning)(ning)(ning)膠從底(di)部脫色(se)(se)。要(yao)查(cha)看小樂隊(dui),您(nin)可以(yi)將運行(xing)時(shi)(shi)(shi)間減少到25分鐘。如(ru)果您(nin)想讓凝(ning)(ning)(ning)膠運行(xing)更長的(de)時(shi)(shi)(shi)間,那么您(nin)可以(yi)*跡。可以(yi)使(shi)用in凝(ning)(ning)(ning)膠染(ran)色(se)(se),然后(hou)縮短后(hou)染(ran)色(se)(se)時(shi)(shi)(shi)間,或者只對凝(ning)(ning)(ning)膠進行(xing)后(hou)染(ran)色(se)(se),而無需(xu)先進行(xing)in凝(ning)(ning)(ning)膠染(ran)色(se)(se)。在(zai)這兩種情(qing)況下,整個凝(ning)(ning)(ning)膠都會(hui)(hui)被染(ran)色(se)(se),并且觀察到非常(chang)低的(de)分子量帶。您(nin)也可以(yi)使(shi)用Midori Green Direct代替Midori Green Advance。該染(ran)料會(hui)(hui)添加到DNA中,因此(ci)無論電(dian)泳多長時(shi)(shi)(shi)間,每(mei)個條(tiao)帶都會(hui)(hui)被染(ran)色(se)(se)。另(ling)一個優點是(shi)(shi)不(bu)存在(zai)背景。特別是(shi)(shi)如(ru)果您(nin)使(shi)用藍色(se)(se)或藍色(se)(se)/綠色(se)(se)LED燈代替紫外線,則會(hui)(hui)收到令人驚奇的(de)信(xin)號。

 

問:在Midori Green Advance數據表上,描述了后期處理多可(ke)以使(shi)(shi)用2-3次。您可(ke)以在不損(sun)失太多敏(min)感(gan)性(xing)的情況下使(shi)(shi)用發(fa)布(bu)后解決方(fang)案多長時間?

答:實際(ji)上,我們的(de)客(ke)戶(hu)使(shi)用(yong)頻率超(chao)過2-3次(ci)。如(ru)果(guo)染色浴始終變(bian)暗,您可(ke)(ke)以在任何(he)情況(kuang)下使(shi)用(yong)2-3次(ci)而(er)不會(hui)(hui)降低(di)信(xin)(xin)號(hao)強度(du)。但(dan)也可(ke)(ke)以使(shi)用(yong)5 – 8次(ci)而(er)不會(hui)(hui)降低(di)信(xin)(xin)號(hao),具體取決于凝膠的(de)大小和樣品量。如(ru)果(guo)您檢測到強度(du)降低(di),則可(ke)(ke)以增加(jia)一點MGA,從而(er)獲得(de)與以前相同的(de)信(xin)(xin)號(hao)強度(du)。

 

問:到(dao)期后可以(yi)使用MGA嗎(ma)?

答:是(shi)(shi)的,您可以使用它。到期日期只是(shi)(shi)我們保(bao)證的短時間(jian)(jian),但通常會持續(xu)更長的時間(jian)(jian)。

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