Platelets are a rich source of many cytokines and chemokines including transforming growth factor β 1 (TGF-β1). TGF-β1 is required to convert conventional CD4+ T (Tconv) cells into induced regulatory T (iTreg) cells that express the transcription factor Foxp3. Whether platelet contents will affect Treg cell properties has not been explored. In this study, we show that unfractionated platelet lysates (pltLys) containing TGF-β1 efficiently induced Foxp3 expression in Tconv cells. The common Treg cell surface phenotype and in vitro suppressive activity of unfractionated pltLys-iTreg cells were similar to those of iTreg cells generated using purified TGF-β1 (purTGFβ-iTreg) cells. However, there were substantial differences in gene expression between pltLys-iTreg and purTGFβ-iTreg cells, especially in granzyme B, interferon γ, and interleukin-2 (a 30.99-, 29.18-, and 17.94-fold difference, respectively) as determined by gene microarray analysis. In line with these gene signatures, we found that pltLys-iTreg cells improved cell recovery after transfer and immune suppressive function compared with purTGFβ-iTreg cells in factor VIII (FVIII)–deficient (F8null, hemophilia A model) mice after recombinant human FVIII (rhF8) infusion. Acute antibody-mediated platelet destruction in F8null mice followed by rhF8 infusion increased the number of Treg cells and suppressed the antibody response to rhF8. Consistent with these data, ex vivo proliferation of F8-specific Treg cells from platelet-depleted animals increased when restimulated with rhF8. Together, our data suggest that pltLys-iTreg cells may have advantages in emerging clinical applications and that platelet contents impact the properties of iTreg cells induced by TGF-β1.
摘要
血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)是(shi)(shi)許(xu)多細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)和(he)(he)(he)趨化因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)豐富來(lai)源，包(bao)括(kuo)轉(zhuan)(zhuan)化生長因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi) β 1 （TGF-β1）。TGF-β1 是(shi)(shi)將常規 CD4+ T （Tconv） 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞轉(zhuan)(zhuan)化為表(biao)(biao)達轉(zhuan)(zhuan)錄因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi) Foxp3 的(de)(de)(de)(de)誘導調節性(xing) T （iTreg） 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞所(suo)必需的(de)(de)(de)(de)。血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)內容物是(shi)(shi)否會影響(xiang)(xiang)Treg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞特性(xing)尚未得到探索(suo)。在(zai)(zai)(zai)這(zhe)(zhe)項研究中，我(wo)(wo)們(men)(men)發現含(han)有 TGF-β1 的(de)(de)(de)(de)普(pu)通(tong)血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)裂解物 （pltLys） 有效地誘導了(le) Tconv 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞中 Foxp3 的(de)(de)(de)(de)表(biao)(biao)達。普(pu)通(tong) pltLys-iTreg 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)(de)常見(jian) Treg 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞表(biao)(biao)面表(biao)(biao)型和(he)(he)(he)體外抑(yi)制(zhi)活性(xing)與純化 TGF-β1 （purTGFβ-iTreg） 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞生成(cheng)的(de)(de)(de)(de) iTreg 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞相(xiang)似(si)。然(ran)而(er)，通(tong)過基(ji)因(yin)(yin)微陣列分(fen)(fen)析確定(ding)，pltLys-iTreg 和(he)(he)(he) purTGFβ-iTreg 細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞之(zhi)間(jian)的(de)(de)(de)(de)基(ji)因(yin)(yin)表(biao)(biao)達存在(zai)(zai)(zai)顯著(zhu)差異，尤其是(shi)(shi)在(zai)(zai)(zai)顆粒酶 B、干擾(rao)素 γ 和(he)(he)(he)白(bai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞介素-2 中（分(fen)(fen)別相(xiang)差 30.99 倍、29.18 倍和(he)(he)(he) 17.94 倍）。根據(ju)這(zhe)(zhe)些基(ji)因(yin)(yin)特征，我(wo)(wo)們(men)(men)發現在(zai)(zai)(zai)重組人FVIII（rhF8）輸(shu)注后，與凝血(xue)(xue)因(yin)(yin)子(zi)(zi)(zi)VIII（FVIII）缺陷(xian)（F8null，血(xue)(xue)友病A模型）小(xiao)(xiao)鼠(shu)中的(de)(de)(de)(de)purTGFβ-iTreg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞相(xiang)比(bi)，pltLys-iTreg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞改善了(le)轉(zhuan)(zhuan)移后的(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞恢復和(he)(he)(he)免(mian)疫抑(yi)制(zhi)功(gong)能。在(zai)(zai)(zai)F8null小(xiao)(xiao)鼠(shu)中，急性(xing)抗(kang)體介導的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)破壞(huai)，然(ran)后輸(shu)注rhF8，增(zeng)加(jia)了(le)Treg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)(de)數(shu)量(liang)，并抑(yi)制(zhi)了(le)對rhF8的(de)(de)(de)(de)抗(kang)體反應。與這(zhe)(zhe)些數(shu)據(ju)一致，當用(yong)rhF8重新刺(ci)激時，來(lai)自(zi)血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)耗盡動物的(de)(de)(de)(de)F8特異性(xing)Treg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)(de)離體增(zeng)殖增(zeng)加(jia)。總之(zhi)，我(wo)(wo)們(men)(men)的(de)(de)(de)(de)數(shu)據(ju)表(biao)(biao)明，pltLys-iTreg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞可能在(zai)(zai)(zai)新興的(de)(de)(de)(de)臨床(chuang)應用(yong)中具有優勢，并且(qie)血(xue)(xue)小(xiao)(xiao)板(ban)含(han)量(liang)會影響(xiang)(xiang)TGF-β1誘導的(de)(de)(de)(de)iTreg細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)(de)性(xing)質。
數據圖片：
原始論文(wen)：
1. TGF-β1 along with other platelet contents augments Treg cells to suppress anti-FVIII immune responses in hemophilia A mice.
背景介紹：
除了在止血中的基(ji)本作用外，血小板還調(diao)節先天(tian)性和適(shi)應性免疫反應.1-6 其免疫調(diao)節活(huo)性的基(ji)礎機制尚不清楚。血小板分泌(mi)
顆粒含有多種介導(dao)生理(li)和病理(li)過(guo)程的(de)生物活性(xing)蛋白.7,8 每天大約有 1011 個新產生的(de)血(xue)小板進入血(xue)液，取代那些老化(hua)或被破壞的(de)
血小(xiao)板(ban)。9-11 吞噬(shi)細胞清除凋亡(wang)血小(xiao)板(ban)通(tong)過產(chan)生調節性細胞因子（包括轉化生長因子 β 1 （TGF-β1） 和白(bai)細胞介素-10
（IL-10））來(lai)產生免疫(yi)調(diao)節微(wei)環境，它(ta)們支持(chi)調(diao)節性 T （Treg） 細胞的發育和功能12-15。
在之前(qian)的研(yan)究中，我們證明了血小板中因子 VIII （FVIII） 或 FIX 的異位表達導致血小板 α 顆粒中 FVIII 或 FIX 的儲存(cun)，并(bing)誘導
血(xue)友病小鼠的(de)抗原特(te)異(yi)性免疫耐受(shou).16-20 盡管介導血(xue)小板(ban)基(ji)因治療后(hou)免疫耐受(shou)的(de)確切機制尚不清楚，但該過程可能(neng)是(shi)血(xue)小板(ban)內
容物所(suo)固有(you)的(de)， 因為血小(xiao)板α顆粒也含有(you)豐富的(de)TGF-β1。事(shi)實上，TGF-β1在(zai)體內的(de)來源是血小(xiao)板.21血小(xiao)板來源的(de)TGF-β1
（pltTGFβ）在支持免疫耐受方面的生理(li)相關性尚不清楚，并且由于儲存在血小板(ban)顆粒(li)中的其他豐富的細胞因子(zi)和趨化因子(zi)
而(er)變得(de)復雜5,22。
pltTGFβ、其(qi)他血小(xiao)板內容(rong)物和(he) Treg 細胞(bao)的(de)特性之(zhi)間可(ke)能存在重(zhong)要(yao)聯系。我們(men)假設(she) pltTGFβ 可(ke)以誘導常規 T （Tconv） 細胞(bao)成
為功能誘導調節(jie)性 T （iTreg） 細(xi)胞，并且血小板中的其他內(nei)容會影響 pltTGFβ 誘導的 Treg 細(xi)胞的性質。在(zai)這項研(yan)究中，我們
檢查了血小板裂解物(wu) （pltLys） 在體外驅動(dong) iTreg 細胞分(fen)化的(de)能力。我們分(fen)析了 pltLys 產生的(de) iTreg 細胞的(de)基因特征、Foxp3
表達的(de)穩定(ding)性和(he)抑制功能。我們還研究了血小(xiao)板和(he)Treg細胞的(de)體內相(xiang)關性以(yi)及它(ta)們在(zai)血友病A（FVIII缺陷，F8null）小(xiao)鼠中(zhong)對(dui)重(zhong)
組FVIII（rhF8）輸注的反應中的免疫抑制功能。我(wo)們的數據顯示，pltTGFβ與其他(ta)血(xue)小板內(nei)容物一(yi)起在改變(bian)Treg細胞的基因表
達(da)特(te)征、促進Treg細(xi)胞穩定性和增強抗原特(te)異性Treg細(xi)胞抑制(zhi)功能方面發(fa)揮重要作用。
