ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

產品簡介：

清除巨噬細(xi)胞(bao)(bao)(depletion of macrophages)是研究巨噬細(xi)胞(bao)(bao)功能的重(zhong)要(yao)方法。荷蘭阿(a)姆斯特(te)丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授(shou)開(kai)發(fa)的一款Clodronate Liposomes，可(ke)以利用巨噬細(xi)胞(bao)(bao)的內(nei)吞機制，將(jiang)脂質體包裹的膜不通透(tou)性(xing)的氯(lv)磷(lin)酸(clodronate)帶入細(xi)胞(bao)(bao)內(nei)，利用“特(te)洛伊木馬(ma)機制”從而達到去除巨噬細(xi)胞(bao)(bao)的目的。

作用原理:

兩親性磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)分(fen)子在水(shui)中(zhong)(zhong)(zhong)可以(yi)形成同心圓形式的(de)(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分(fen)子層球體，磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分(fen)子層中(zhong)(zhong)(zhong)間通(tong)過水(shui)相(xiang)分(fen)隔(ge)。溶(rong)解在水(shui)溶(rong)液中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)在形成脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體的(de)(de)(de)過程中(zhong)(zhong)(zhong)被(bei)(bei)包(bao)裹進(jin)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分(fen)子層之間的(de)(de)(de)水(shui)相(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)(如圖1)。游離的(de)(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)不能自由的(de)(de)(de)通(tong)過脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體的(de)(de)(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)雙分(fen)子層。隨著脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體被(bei)(bei)巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)吞噬(shi)(shi)，在巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)酶體磷(lin)(lin)酸酶的(de)(de)(de)作(zuo)用下，溶(rong)解在脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)體水(shui)相(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)就可以(yi)被(bei)(bei)逐步釋(shi)放出來，并累積在細(xi)胞(bao)內，當其達(da)到(dao)一定濃度(du)時，巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)將會受(shou)到(dao)不可逆轉的(de)(de)(de)損傷(shang)，從(cong)而進(jin)入凋亡(wang)過程。從(cong)死(si)亡(wang)的(de)(de)(de)巨噬(shi)(shi)細(xi)胞(bao)中(zhong)(zhong)(zhong)釋(shi)放出來的(de)(de)(de)氯磷(lin)(lin)酸鹽(yan)在細(xi)胞(bao)外的(de)(de)(de)半(ban)衰(shuai)期極短(大約15min)，可以(yi)通(tong)過泌尿系統排除體外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽脂質體(ti)和對照脂質體(ti)（PBS）

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體CP-005-005構成：

氯膦酸鹽脂質體：

由(you)同(tong)心磷脂雙層構成(cheng)的人造球，該雙層包裹著含有氯膦酸(suan)鹽的PBS（磷酸(suan)鹽緩(huan)沖液(ye)）水溶液(ye)。脂質體是顆粒，大小大。3微(wei)米。它(ta)們(men)在(zai)PBS中形成(cheng)懸浮(fu)液(ye)，在(zai)儲存時會(hui)沉(chen)淀(dian)，在(zai)試管或燒瓶的底部形成(cheng)沉(chen)淀(dian)。在(zai)對實驗動物給藥之前，應先搖晃懸浮(fu)液(ye)，以(yi)回收(shou)均勻的懸浮(fu)液(ye)。

對照脂質體（PBS）：

對照(zhao)脂(zhi)(zhi)質體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS，可用于對照(zhao)實驗，以查明注(zhu)射氯膦酸鹽脂(zhi)(zhi)質體后(hou)觀察到的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產品描述

磷脂(zhi)雙層由(you)磷脂(zhi)酰膽堿(jian)和膽固醇(chun)組成。將所有(you)脂(zhi)質(zhi)體制劑懸浮在無菌磷酸鹽(yan)緩(huan)沖鹽(yan)水（PBS）中(zhong)：

– 10 mM的Na2HPO4；

– 10毫米NaH2PO4；

– 140毫米氯(lv)化(hua)鈉(na)。

我(wo)們所有的(de)(de)脂質(zhi)體均(jun)帶負電荷，因此(ci)不會一起阻塞。懸浮液(ye)中的(de)(de)脂質(zhi)體沒有大(da)(da)小，這意(yi)味(wei)著它也(ye)包含(han)越來越大(da)(da)的(de)(de)脂質(zhi)體（大(da)(da)3微(wei)米）。平均(jun)而言，脂質(zhi)體的(de)(de)大(da)(da)小為1.7微(wei)米。

氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)脂質(zhi)體：人工制備的脂質(zhi)囊泡的懸浮(fu)液，包裹了氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)。懸浮(fu)液中氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)的濃度(du)約為(wei)。5毫(hao)克/毫(hao)升 氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)酸(suan)鹽(yan)以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形(xing)式封裝在脂質(zhi)體囊泡中。

PBS脂(zhi)質(zhi)體(ti)：人(ren)工制備的(de)脂(zhi)質(zhi)囊泡的(de)懸(xuan)浮液(ye)，其中包裹(guo)了PBS水溶液(ye)。這些不含氯膦酸(suan)鹽(yan)，可(ke)用于對照(zhao)實驗(yan)。

熒光(guang)DiI脂質體(ti)(ti)：人(ren)工制(zhi)備(bei)的脂質囊泡的懸浮液(ye)，其中(zhong)包(bao)封了PBS水溶(rong)液(ye)，并用熒光(guang)染(ran)料(liao)DiI標記。它們不含氯膦(lin)酸鹽，可(ke)用于研究通過特定給藥途(tu)徑(jing)注射的脂質體(ti)(ti)是否能夠到達要研究的巨(ju)噬細胞。

儲存和使(shi)用說明

到達(da)脂(zhi)質(zhi)體(ti)后，應將其(qi)儲(chu)存在4 – 8ºC（或(huo)39 – 47ºF）之間。脂(zhi)質(zhi)體(ti)懸浮液不得冷(leng)凍，也不要(yao)暴露于高(gao)溫下。這可能(neng)會(hui)對磷脂(zhi)雙(shuang)層造成干擾(rao)，可能(neng)導(dao)致氯膦酸(suan)鹽從脂(zhi)質(zhi)體(ti)中泄漏出來。

給藥(yao)前，首先使脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)達到室(shi)溫，然(ran)后(hou)輕輕搖動(dong)(dong)或攪拌懸浮液(ye)。一(yi)段(duan)時間(jian)(jian)后(hou)，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)易(yi)于沉(chen)淀，導致小瓶中的分布不均勻。當注(zhu)(zhu)(zhu)射(she)(she)花費太多時間(jian)(jian)時，脂(zhi)質(zhi)(zhi)體(ti)甚至可能在注(zhu)(zhu)(zhu)射(she)(she)器中沉(chen)淀。如果使用同(tong)一(yi)注(zhu)(zhu)(zhu)射(she)(she)器注(zhu)(zhu)(zhu)射(she)(she)多只(zhi)動(dong)(dong)物，可能會導致劑量不同(tong)。

不(bu)建議稀釋懸(xuan)浮液(ye)，但如(ru)有必要，請使用(yong)PBS或鹽水(shui)。

我們建議客戶在(zai)發(fa)貨后(hou)16周內(nei)使用(yong)脂(zhi)質體(ti)制劑。強(qiang)烈建議不要在(zai)到期(qi)(qi)日期(qi)(qi)之后(hou)使用(yong)。在(zai)此(ci)期(qi)(qi)間之后(hou)，污染的風險會(hui)增加，并且可能(neng)(neng)會(hui)發(fa)生輕(qing)微的功(gong)能(neng)(neng)喪失。

作用機理(li)

巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)在(zai)免(mian)疫(yi)和非(fei)(fei)免(mian)疫(yi)防御機制(zhi)中起重要作(zuo)用。它(ta)們是抵(di)御滲透到脊椎動物(wu)(wu)體內的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)菌，病(bing)毒和其他形式(shi)的(de)微生物(wu)(wu)污染的(de)首(shou)道防線。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)是大型(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，幾乎存在(zai)于(yu)所(suo)(suo)有(you)身(shen)體組織中，它(ta)們可以具有(you)不同(tong)的(de)形式(shi)和名稱(cheng)（例如(ru)庫普(pu)弗細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，肺泡(pao)巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，小膠(jiao)質細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，破骨細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，紅髓(sui)巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)）。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)“清除”，它(ta)們攝入并消(xiao)化(hua)可能是潛在(zai)病(bing)原(yuan)體的(de)所(suo)(suo)有(you)異(yi)物(wu)(wu)，微生物(wu)(wu)，癌細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)和細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)碎片。該(gai)過程稱(cheng)為(wei)吞噬(shi)(shi)作(zuo)用。巨(ju)(ju)噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)主要通過可溶性分(fen)子(zi)如(ru)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)因(yin)子(zi)和趨化(hua)因(yin)子(zi)的(de)介導來進一步調(diao)節許多(duo)非(fei)(fei)吞噬(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)功能。他們參與(yu)先(xian)天免(mian)疫(yi)，

脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)是(shi)(shi)人(ren)工制(zhi)備的(de)球(qiu)體(ti)(ti)，由同心(xin)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)組成(cheng)。當磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)分散在(zai)(zai)水(shui)中時，親(qin)水(shui)性(xing)(xing)頭部將構成(cheng)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)的(de)兩個(ge)外部部分，而(er)疏水(shui)性(xing)(xing)脂(zhi)(zhi)肪酸基團(tuan)將構成(cheng)內部部分（見(jian)(jian)圖(tu)1）。水(shui)室分隔(ge)雙(shuang)層(ceng)(ceng)，親(qin)水(shui)分子可以溶(rong)解在(zai)(zai)其中，形成(cheng)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)包(bao)封(feng)的(de)分子。氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)（二氯(lv)(lv)亞甲基雙(shuang)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸酯或(huo)Cl2MBP）是(shi)(shi)一種親(qin)水(shui)性(xing)(xing)分子，可以封(feng)裝(zhuang)在(zai)(zai)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)中。游離氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)不易穿過(guo)(guo)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)膜，并通(tong)(tong)過(guo)(guo)腎臟系(xi)統從循環中迅速(su)清除（即數分鐘內）。但是(shi)(shi)，氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)包(bao)埋在(zai)(zai)脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)中時，會被(bei)巨噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)吞(tun)噬(shi)，無法逃脫(tuo)（見(jian)(jian)圖(tu)2）。磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)被(bei)溶(rong)酶體(ti)(ti)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)酶消化(hua)，而(er)氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)未(wei)被(bei)消化(hua)并且保(bao)留在(zai)(zai)巨噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中。巨噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)攝入的(de)磷(lin)(lin)脂(zhi)(zhi)雙(shuang)層(ceng)(ceng)和脂(zhi)(zhi)質(zhi)體(ti)(ti)越(yue)多，在(zai)(zai)巨噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內積累的(de)氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)越(yue)多。超過(guo)(guo)一定(ding)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)內濃度，氯(lv)(lv)膦(lin)(lin)(lin)(lin)酸鹽(yan)將通(tong)(tong)過(guo)(guo)啟動(dong)程序性(xing)(xing)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)死(si)亡(wang)（即凋亡(wang)）來消除巨噬(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。

圖(tu)1.氯(lv)膦酸鹽(yan)脂(zhi)質體(ti)的示(shi)意圖(tu)。囊(nang)泡由(you)同心的磷脂(zhi)雙(shuang)層構成(cheng)，被(bei)水性隔室隔開(kai)。雙(shuang)層由(you)親水和疏水基團組(zu)成(cheng)。將氯(lv)膦酸鹽(yan)（在此以(yi)黑色方塊(kuai)表(biao)示(shi)）溶解在水溶液中并(bing)封裝(zhuang)在脂(zhi)質體(ti)內。

圖2.巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)對氯膦酸鹽脂質體(ti)的(de)(de)攝(she)取和消化示意(yi)圖。巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)通過(guo)(guo)胞(bao)(bao)吞作用攝(she)入(ru)氯膦酸鹽脂質體(ti)，然后與含有磷(lin)脂酶的(de)(de)溶(rong)酶體(ti)（L）融合（箭頭）。磷(lin)脂酶破(po)壞的(de)(de)磷(lin)脂雙層越多(duo)，在巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)內釋(shi)放的(de)(de)氯膦酸鹽（黑色方塊）越多(duo)。巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)終通過(guo)(guo)凋亡被殺死。（N =巨(ju)噬細(xi)胞(bao)(bao)核）。

因此(ci)，氯膦酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質(zhi)體可用于通(tong)過消耗(hao)巨噬細(xi)胞(bao)來研(yan)究巨噬細(xi)胞(bao)功能。例如，它(ta)們可以(yi)應用于各種(zhong)自(zi)身免(mian)疫性疾(ji)病，移植(zhi)，神經系統疾(ji)病和基因治療(liao)的模(mo)型(xing)。氯膦酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質(zhi)體只有(you)在可以(yi)達到的情況下(xia)才能耗(hao)盡巨噬細(xi)胞(bao)。一些組織可以(yi)形成脂(zhi)質(zhi)體的屏(ping)障。通(tong)過選擇氯膦酸(suan)鹽(yan)脂(zhi)質(zhi)體的正確給藥途徑，可以(yi)耗(hao)盡特定(ding)的器官或組織的巨噬細(xi)胞(bao)。有(you)關管理(li)協議的更多信息(xi)，請單擊此(ci)處。

PBS脂質體(ti)(ti)主要用(yong)(yong)于(yu)對(dui)照實驗。但是(shi)，這些也可以在某(mou)些時(shi)間段內通(tong)過飽和(he)(he)來阻(zu)止吞噬作(zuo)用(yong)(yong)。因此，PBS脂質體(ti)(ti)不能(neng)(neng)代(dai)表正常健康(kang)的(de)(de)，未阻(zu)斷的(de)(de)，未抑制(zhi)的(de)(de)和(he)(he)未活化的(de)(de)巨噬細胞的(de)(de)對(dui)照實驗。當比較氯膦酸鹽脂質體(ti)(ti)和(he)(he)PBS脂質體(ti)(ti)的(de)(de)作(zuo)用(yong)(yong)時(shi)，其作(zuo)用(yong)(yong)因此可能(neng)(neng)小于(yu)預期。

有關更多(duo)信息，請(qing)參(can)見：

– Van Rooijen，N.和(he)Sanders，A.（1994）。脂(zhi)質體(ti)介導的巨(ju)噬細胞耗(hao)竭：作(zuo)用機理，脂(zhi)質體(ti)制備和(he)應用。免疫學雜志，174（1-2），83-93。

– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和(he)van den Berg，TK（1996）。脂質體(ti)介導的(de)氯膦酸鹽和(he)丙am的(de)細胞內(nei)遞(di)送誘(you)導的(de)巨噬細胞凋亡。免(mian)疫學雜志，193（1），93-99。

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝

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